吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (3): 634-639.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230311
张斯琦1,2,孙美琪2,李泽颢2,刘丹丹2,胡城2,方芳2(),王国庆1()
Siqi ZHANG1,2,Meiqi SUN2,Zehao LI2,Dandan LIU2,Cheng HU2,Fang FANG2(),Guoqing WANG1()
摘要:
目的 探讨CD147对前列腺癌(PCa)LNCaP细胞糖酵解的影响,为PCa临床诊断和治疗提供新的分子标志物和靶点。 方法 采用慢病毒感染系统建立沉默CD147的细胞作为LNCaP/shCD147组,同时设立阴性对照组(LNCaP/scramble组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组LNCaP细胞中CD147 mRNA表达水平,试剂盒检测2组LNCaP细胞中乳酸(LA)、丙酮酸(PA)和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)浓度及2组LNCaP细胞中丙酮酸激酶(PK)、6-磷酸果糖激酶1 (PFK1)和己糖激酶(HK)酶活性,Western blotting 法检测2组LNCaP细胞中CD147、HK2、肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)和丙酮酸激酶M2(PKM2)蛋白表达水平。 结果 与LNCaP/scramble组比较,LNCaP/shCD147组细胞中CD147 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),表明成功构建沉默CD147的PCa LNCaP细胞模型。与LNCaP/scramble组比较,LNCaP/shCD147组细胞中LA、PA和ATP浓度明显降低(P<0.05或P<0.01)。与LNCaP/scramble组比较,LNCaP/shCD147组细胞中PK、PFK1和HK酶活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。Western blotting 法检测,与LNCaP/scramble组比较,LNCaP/shCD147组细胞中HK2蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。 结论 沉默CD147通过调节糖酵解代谢产物、限速酶活性和相关蛋白表达水平抑制LNCaP细胞糖酵解过程。
中图分类号: